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药理研究--清肺胶囊对小鼠三种移植性肿瘤生长的作用研究
  清肺胶囊[1]由石羔、川贝母、金银花、麻黄、苦杏仁等中药材组成,是山西省曲沃县传统医学研究所曹子青和北京朝阳门医院 集十多年临床治疗经验,在麻杏石甘汤基础上,重用止咳祛痰平喘药,同时加入清热燥湿解毒药,组成了一个新配方。具有清热化痰、止咳平喘的功能。经多年的临床观察证明,对于气管炎、支气管肺炎、支气管哮喘、假性球麻痹及慢性咽炎等引起的咳、痰、喘都有显著的疗效,实属在继承传统中医药基础上的创新和发展,是中药研究开发的方向。临床发现,清肺胶囊还可缓解由肺癌引起的咳、痰、喘、咯血、胸闷、气短及乏力等症状,为阐明其作用与机理,现对其抑瘤作用进行了如下实验。

一、实验时间:2002年9月至2002年12月

二、材料及设备
1.受试药物
清肺胶囊由北京市东城区朝阳门医院、山西省曲沃县传统医学研究所曹子青提供。药粉用蒸馏水配制成混悬液,供小鼠灌胃给药,剂量为0.2275g/kg、0.6825g/kg和2.0475g/kg。
2. 阳性对照药
环磷酰胺(CTX):上海华联制药有限公司生产,批号:011009,用前用生理盐水溶解成所需浓度,供小鼠腹腔注射。
3. 动物
昆明Ⅱ级小鼠,雌雄各半,体重18-22克,中国医学科学院实验动物研究所提供,许可证编号:SCXK11-00-0006
C57BL/6JⅡ级小鼠,雄性,体重18-22克,中国医学科学院实验动物研究所提供,许可证编号:SCXK11-00-0006
4. 瘤株
小鼠Lewis肺癌、肝癌H22、肉瘤180,由卫生部生物制品鉴定所药理室提供。
5. 设备
显微镜:BH-2OLYMPUS
电子天平:SARφYIUS BS210S MAX 210g d=0.1mg

三、方法及结果
1. 清肺胶囊对小鼠Lewis肺癌生长的影响[2]:
  实验方法:取C57小鼠(雄性),体重18-22g,右腋皮下接种Lewis肺癌瘤细胞悬液(瘤组织块∶生理盐水为1∶3),无菌匀浆0.2ml/只接种后,按体重随机分为5组,即蒸馏水对照组、环磷酰胺(CTX)20mg/kg组,清肺胶囊0.2275、0.6825、2.0475g粉/kg三个剂量组。除蒸馏水对照组20只外,其余各组均10只,接种24小时后给药,除CTX腹腔注射(隔日一次,共七次)外,其余各组灌胃0.2ml/20g体重药液,蒸馏水对照组灌胃同体积的蒸馏水,每日一次,连续14天。末次给药后次日,各组小鼠称重后处死,剥离瘤块称重,各组数据均经统计学处理,两次实验结果见表1。
表1 清肺胶囊对小鼠Lewis肺癌生长的影响
  实验结果:两次实验表明,清肺胶囊0.6825g/kg和2.0475g/kg两剂量组,灌胃给药14天,对小鼠Lewis肺癌生长有明显抑制作用,抑制率分别为33.45%、32.12%和40.52%、44.40%,0.2275g/kg组抑制作用次之,有一定的量效关系。

2. 清肺胶囊对小鼠肝癌H22生长的影响[3]
  实验方法:取健康昆明Ⅱ级小鼠(雌雄各半),体重18-22g,右腋皮下接种肝癌H22生理盐水瘤细胞悬液(1.0-1.08)×106个瘤细胞/只,接种后按体重随机分组,蒸馏水对照组、环磷酰胺(CTX)20mg/kg组,清肺胶囊0.2275、0.6825、2.0475g/kg三个剂量组,除蒸馏水对照组20只外,其余各组均10只,接种24小时后,各组除CTX腹腔注射给药(隔日一次,总计七次)外,均灌胃给药,每只0.2ml,蒸馏水对照组给同体积的蒸馏水,每日一次,连续14天,末次给药后次日,各组小鼠称重后用颈椎脱臼法处死,剥离瘤体称重,各组实验数据均经统计学处理,两次实验结果见表2。
实验结果:清肺胶囊两次实验表明,0.6825g/kg和2.0475g/kg对小鼠肝癌H22生长有明显抑制作用,抑制率分别为37.50%、31.49%和43.75%、38.30%,而小剂量组0.2275g/kg抑制率分别为24.48%和20.43%,抑制作用则不明显,有一定的量效关系。第一次实验结束后,中、高剂量组动物共死亡4只,其中3只死于喉头水肿阻塞,一只死于食管破裂。

3. 清肺胶囊对小鼠肉瘤180生长的影响[4]
  实验方法:取健康昆明Ⅱ级小鼠(雌雄各半),体重18-22g,将生长良好的肉瘤180A
表2 清肺胶囊对小鼠肝癌H22生长的影响
瘤细胞液,加生理盐水制成细胞悬液,在无菌条件下接种于昆明小鼠右腋皮下(每只1×106个瘤细胞,0.2ml),接种后按体重随机分为5组,即蒸馏水对照组、阳性对照药CTX20mg/kg(每日腹腔注射一次)组和清肺胶囊0.2275、0.6825、2.0475g/kg三个剂量组,除蒸馏水对照组20只外,其余各组均10只,于接种24小时灌胃给药,每日一次,连续14天,蒸馏水对照组给同体积的蒸馏水,末次给药后次日,各组小鼠称重后处死,剥离瘤块称重,各组数据均经统计学处理,两次实验结果见表3。
表3 清肺胶囊对小鼠肉瘤180生长的影响
  实验结果:两次实验说明,清肺胶囊0.2275g/kg、0.6825g/kg、2.0475g/kg,小、中、大三个剂量组,连续灌胃给药肉瘤180小鼠,对其肿瘤生长均未见有明显的影响。第二次实验结束后,中剂量组动物因食管破裂死亡2只。

四、结论
1.清肺胶囊连续给Lewis肺癌和肝癌H22小鼠灌胃给药14天,均能明显抑制两种肿瘤的生长。
2. 清肺胶囊0.6825g/kg和2.0475g/kg两剂量组两次实验对小鼠Lewis肺癌瘤重抑制率分别为33.45%、32.12%和40.52%、44.40%。
3. 清肺胶囊0.6825g/kg和2.0475g/kg两剂量组两次实验对肝癌H22瘤重抑制率分别为37.50%、31.49%和43.75%、38.30%。
4.清肺胶囊连续给肉瘤180小鼠灌胃给药14天,两批实验三个剂量组,均未见对其生长有明显的抑制作用。
  以上实验结果表明,清肺胶囊对小鼠Lewis肺癌和肝癌H22小鼠肿瘤的生长有明显的抑制作用,为临床治疗肺癌、肝癌提供了药理学依据。

参考文献
(1)曹子青,曹俊奇.清肺胶囊的药理学研究.中成药.2001.23(5)363-366.
(2)中华人民共和国卫生部新药审批方法.1992.
(3)李仪奎等.中药药理学实验方法.上海科学技术出版社.1991.
(4)卫生部药政管理局中药新药研究指南.104(内部发行).

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