中风复康胶囊动物长期毒性试验报告

    1、实验时间：1999年2月-1999年5月

    2、实验材料

①药物：中风复康胶囊，中药复方制剂，由山西省曲沃传统医学研究所、北京市朝阳门医院曹子青提供，每粒胶囊装中药粉0.3g，以蒸馏水配制成40%混悬液供动物灌胃使用。

②实验动物：健康Wistar大鼠，体重90-120g雌雄各半，山西中医学院药理教研室动物房提供。

3、实验方法

健康Wistar大鼠160只，按性别及体重随机搭配分为四组，每组40只，雌雄各半。前三组分别为中风复康胶囊高、中、低三种剂量给药组，每d口服中风复康胶囊剂量为：高剂量组12g/kg体重·日（相当于成人剂量的100倍）；中剂量组给6g/kg体重·日（相当于成人剂量的50倍）；低剂量组3g/kg体重·日（相当于成人剂量的25倍），连续给药180d。第四组为空白对照组，灌胃等体积的蒸馏水。各组动物均在20±2℃室内常规饲养。给药前及给药期间每60d称动物体重一次。连续给药90d后各组随机杀取大鼠10只（雌雄各5只），进行血象（Hb、RBC、WBC、及WBC分类计数）以及肝功能（SGPT、TTT）和肾功能（BUN、Cr）检查。每组剩余的30只大鼠继续给药到180d。连续给药180d后各组随机杀取24只大鼠（雌雄各12只），每组留下6只大鼠（雌雄各3只），停药21d再杀取（如有毒性，以便观察停药后机体自然恢复情况，也可观察迟缓性毒性）。连续给药180d以及停药21d杀取的这两批大鼠（每组各30只）除同上进行血象、肝功能和肾功能检查外，还对动物重要生命器官--肝、肾、心、肺、脑进行解剖观察，并各取组织块于福尔马林液内固定，石蜡包埋切片，HE染色，置光学显微镜下观察。

4、实验结果

①中风复康胶囊对幼年大鼠体重增长的影响：中风复康胶囊高、中、低三种剂量连续给药对幼年大鼠体重增长都有不同程度的促进作用。实验结果见表1。

从表1可见，中风复康胶囊对大鼠连续给药（口服）后，可促进幼年大鼠的生长发育，其体重增长较空白对照组明显增快，而且这种促进机体生长作用随药物剂量的增大和用药时间的延长而明显增强。

表1  中风复康胶囊连续给药对大鼠体重增长的影响（X±SD）

组别       n    

给药剂量 (g/kg)

连续给药时间（天）后的体重（g）

 

 

0

60

120

180

对照组    40

0

115.14±13.11

145.87±24.69

201.38±28.98

217.51±35.47

低剂量组  40
(30)

3

114.15±15.42

155.08±9.98

209.67±26.75

220.36±39.76

中剂量组  40
(30)

6

110.40±15.65

162.37±22.01

236.87±28.29

250.58±38.06

高剂量组  40
(30)

12

109.87±11.58

189.44±23.79

238.85±30.79

267.45±49.18

注：△P＞0.05  ☆P＜0.05  ☆☆P＜0.01(与对照组比较)

120d-180d各组大鼠为30只。

上述实验结果表明，大鼠口服中风复康胶囊较大剂量（为成年剂量的25倍、50倍及100倍）和较长时程（连续用药180d），随用药剂量增大和时程延长，还有显著的增进食欲、促进生长、增加体重的补益强壮作用。

②中风复康胶囊连续给药90d对大鼠血象、肝功能和肾功的影响：实验结果见表2和表3。对动物的血象、肝功能和肾功能的各项检查指标均无明显毒性影响，各给药组各项指标与空白对照组相应指标比较，均无显著差异（P＞0.05）。

表2  中风复康胶囊连续给药90天对大鼠血象的影响（X±SD）

组别

n

Hb (g/L)

RBC (1012/L)

WBC (109/L)

WBC分类（%）

 

 

 

 

 

分叶

淋巴

杆状

单核

酸性

对照组

20

173.43±8.76

5.62±1.87

9.98±8.76

23.8

72.6

1.2

2.0

1.3

低剂量组

20

170.50±7.48

5.19±0.61

8.96±2.83

24.2

71.9

1.7

2.1

1.8

中剂量组

20

171.28±4.03

5.59±0.72

8.74±4.21

25.1

71.4

1.9

1.8

2.0

高剂量组

20

172.15±3.69

5.23±0.64

7.98±3.96

24.1

72.3

2.6

1.9

1.7

注：各组均值都在生理值范围内，各给药组与空白对照组比较，均无显著性差异（P＞0.05）。

表3  中风复康胶囊连续给药90天对大鼠肝功能和肾功能的影响（X±SD）

组别

n

肝  功  能

肾  功  能

 

 

SGPT (赖氏单位)

TTT (单位)

 

BuN (mmoL/L)

Cr (umoL/L)

高剂量组

20

28.40±14.01

3.00±0.57

4.95±0.85

56.40±35.41

中剂量组

20

25.90±19.85

3.10±0.82

5.76±0.80

55.60±22.44

低剂量组

20

28.40±13.74

2.90±0.32

6.10±0.83

64.80±31.28

空白对照组

20

30.80±23.82

3.50±1.85

5.56±1.77

70.06±28.17

注：各组各指标数值均在生理值范围内。

③中风复康胶囊连给药180d对大鼠血象、肝肾功能的影响；实验结果见表4和表5。高、中、低三种剂量对动物的血象、肝肾功能均无毒性影响。高剂量对动物的造血机能尚有兴奋作用，使血红蛋白（Hb）含量和红细胞（RBC）数均较空白对照组增高，尤其是红细胞数显著增高（P＜0.01）。此外，高、中剂量对动物肾功能亦有一定的有益作用，能提高肾脏排泄蛋白质代谢产物--肌酐的功能，从而明显降低血肌酐含量。

表4  中风复康胶囊给药180天对大鼠血象的影响（X±SD）

组别     n

Hb (g/L)

RBC  (1012/L)

WBC (109/L)

WBC分类计数(%)

 

 

 

 

多核

带核

单核

淋巴

嗜酸性

高剂量组  20

182.81±8.30

8.28±0.30

15.46±5.48

21.30±2.95

1.15±0.66

1.74±0.74

76.5±4.04

0.29±0.07

中剂量组  20

175.75±14.18

7.80±0.56

15.69±6.19

21.20±2.91

0.92±0.74

1.58±0.84

77.00±3.47

0.20±0.06

低剂量组  20

179.60±14.96

8.12±0.45

16.20±6.37

15.8±2.65

0.88±0.66

2.00±1.20

83.81±4.38

0.54±0.50

空白对照组20

178.24±14.68

7.64±0.45

16.00±5.24

12.6±2.05

8.90±0.47

3.98±1.75

82.56±3.65

0.25±0.16

注：各组数值均在生理值范围内，各给药组与空白对照组比较，☆P＜0.05，☆☆P＜0.01，其余P＞0.05。

表5  中风复康胶囊给药180天对大鼠肝肾功能的影响（X±SD）

组别       n

肝功能

肾功能

 

 

SGPT （赖氏单位）

TTT （单位）

 

BuN (mmoL/L)

Cr (umoL/L)

高剂量组  20

30.25±18.15

2.38±0.48

5.80±0.76

64.96±35.64

 

中剂量组  20

33.96±16.28

2.21±0.47

5.51±0.81

74.68±26.17

 

低剂量组  20

36.08±16.89

2.24±0.44

4.86±0.56

93.15±35.75

 

空白对照组20

37.25±14.16

2.27±0.38

5.91±0.88

105.60±48.16

 

注：a 各组各指标数值均在生理值范围内；

b 各给药组各指标与空白对照组比较，☆P＜0.05，其余P＞0.05。

④中风复康胶囊连续给药180d并停药21d后对大鼠血象、肝肾功能的影响：实验结果见表6和表7。高、中、低三剂量，对动物的血象、肝功能和肾功能亦均无毒性影响。各给药组各项指标与空白对照组相应指标比较，其差异均无显著意义（P＞0.05）。

⑤对大鼠重要组织病理形态学的影响：中风复康胶囊高、中、低三种剂量连续给药180d及给药180d后停药21d的两批大鼠，以及空白对照组大鼠，在给药期和停药期满后24h，将大鼠断头处死，立即剖取动物的心、肝、肺、肾、脑组织块，各鼠各器官取材于同一部位，常规固定、包埋、切片、H、E染色，光镜观察。

表6  连续给药180天停药21天后对大鼠血象的影响（X±SD）

组  别     n

Hb (g/L)

RBC (1012/L)

WBC 109/L

WBC分类计数（%）

 

 

 

 

嗜中性

淋巴

酸性

高剂量组   6

185.56±19.14

7.18±0.66

18.2±4.45

18.6±2.09

81.5±3.45

0.54±0.27

中剂量组   6

174.35±22.44

7.51±0.93

18.1±4.34

24.6±2.90