救脑益智胶囊长期毒性试验报告
侯景伦
山西中医学院药理教研室
一、实验材料
(一)药物：救脑益智胶囊，中药复方制剂，由山西曲沃传统医学研究所提供，每粒胶囊装中药粉0.3g，以蒸馏水配制成40%混悬液供动物灌胃使用。
(二)实验动物：健康Wistar大鼠，体重90-120g，雌雄各半，山西中医学院药理教研室动物房提供。
二、实验方法
健康Wistar大鼠160只，按性别及体重分层随机搭配分为四组，每组40只，雌雄各半。前三组分别为救脑益智胶囊高、中、低三种剂量给药，每d口服救脑益智胶囊剂量为：高剂量组12g/kg体重·日(相当于成人剂量的100倍)；中剂量组6g/kg体重·日(相当于成人剂量的50倍)；低剂量组3g/kg体重·日(相当于成人剂量的25倍)，连续给药180d。第四组为空白对照组，等体积的蒸馏水灌胃。各组动物均在20±2℃室内常规饲养。给药前及给药期间每60d称动物体重一次。连续给药90d后各组随机杀取大鼠10只(雌雄各5只)，进行血象(Hb、RBC、WBC、及WBC分类计数)以及肝功能(SGPT、TTT)和肾功能(BuN、C
r)检查。每组剩余的30只大鼠继续给药到180d。连续给药180d后各组随机杀取24只大鼠(雌雄各12只)，每组留下6只大鼠(雌雄各3只)，停药21d再杀取．(如有毒性，以便观察停药后机体自然恢复情况，也可观察迟缓性毒性)。连续给药180d以及停药21d杀取的这两批大鼠(每组各30只)除同上进行血象、肝功能和肾功能检查外，还对动物重要生命器官--肝、肾、心、肺、脑进行解剖观察，并各取组织块于福尔马林液内固定，石蜡包埋切片，H、E染色，置光学显微镜下观察。
三、实验结果
(一)救脑益智胶囊对幼年大鼠体重增长的影响：救脑益智胶囊高、中、低三种剂量连续给药对幼年大鼠体重增长都有不同程度的促进作用。实验结果见表1。
从表1可见，救脑益智胶囊对大鼠连续给药(口服)，可促进幼年大鼠的生长发育，其体重增长较空白对照组明显增快，而且这种促进机体生长作用随药物剂量的增大和用药时间的延长而明显增强。
表1 救脑益智胶囊连续给药对大鼠体重增长的影响(X±SD)
| 组 别 |
n |
给药剂量(g/kg) |
连续给药不同时间（d）后的体重（g） |
| 0 |
60 |
120 |
180 |
| 对 照 组 |
40 |
0 |
115.14±13.11 |
145.87±24.69 |
201.38±28.98 |
217.51±35.47 |
| 低剂量组 |
40 |
3 |
114.15±15.42 |
155.08±9.98 |
209.67±26.75 |
220.36±39.76 |
| (30) |
|
|
|
|
|
| 中剂量组 |
40 |
6 |
110.40±15.65 |
162.37±22.01 |
236.87±28.29 |
250.58±38.06 |
| (30) |
|
|
|
|
|
| 高剂量组 |
40 |
12 |
109.87±11.58 |
189.44±23.79 |
238.85±30.79 |
367.45±49.18 |
| (30) |
|
|
|
|
|
注：P＞0．05 P＜0．05 P0．01(与对照组比较)。
120d、180d两组大鼠为30只。
上述实验结果表明，大鼠口服救脑益智胶囊较大剂量(为成年剂量的25倍、50倍及100倍)和较长时程(连续用药180d)，随用药剂量的增大和时程延长，还有显著的增进食欲、促进生长、增加体重的补益强壮作用。
(二)救脑益智胶囊连续给药90d对大鼠血象、肝功能和肾功能的影响：实验结果见表2和表3。各给药组各项指标与空白对联组相应指标比较，均无显著差异(P＞0．05)，对动物的血象、肝功能和肾功能的各项检查指标均无明显毒性影响。
表2 救脑益智胶囊连续给药90天对大鼠血象的影响(X±SD)
| 组 别 |
n |
Hb(g/L) |
RBC(10.12/L) |
WBC(10.9/L) |
WBC分类(%) |
| 分叶 |
淋巴 |
杆状 |
单核 |
酸性 |
| 对 照 组 |
20 |
173.43±8.76 |
5.62±1.87 |
9.98±3.67 |
23.8 |
72.6 |
1.2 |
2.0 |
1.3 |
| 低剂量组 |
20 |
170.50±7.48 |
5.19±0.61 |
8.96±2.83 |
24.2 |
71.9 |
1.7 |
2.1 |
1.8 |
| 中剂量组 |
20 |
171.28±4.03 |
5.59±0.72 |
8.74±4.21 |
25.1 |
71.4 |
1.9 |
1.8 |
2.0 |
| 高剂量组 |
20 |
172.15±3.69 |
5.23±0.64 |
7.98±3.96 |
24.1 |
72.3 |
2.6 |
1.9 |
1.7 |
注：各组均值都在生理值范围内，各给药组与空白对照组比较，均无显著性差异(P＞0．05)
表3 救脑益智胶囊连续给药90天对大鼠肝功能和肾功能的影响(X±SD)
| 组 别 |
n |
肝功能 |
肾功能 |
| SGPT(赖氏单位) |
TTT(单位) |
BuN(mmol/L) |
Cr(μmol/L) |
| 高剂量组 |
20 |
23.40±14.01 |
3.00±0.57 |
4.95±0.85 |
56.40±35.41 |
| 中剂量组 |
20 |
25.90±19.85 |
3.10±0.82 |
5.76±0.80 |
55.60±22.44 |
| 低剂量组 |
20 |
23.40±13.74 |
2.90±0.32 |
6.10±0.33 |
64.80±31.23 |
| 空白对照组 |
20 |
30.80±23.82 |
3.50±1.85 |
5.56±1.77 |
70.06±23.17 |
注：各组各指标数量均在生理值范围内，且无显著性差异(P＞0．05)。
(三)救脑益智胶囊连续给药180d对大鼠血象、肝、肾功能的影响；实验结果见表4和表5。高、中、低三种剂量对动物的血象、肝肾功能均无毒性影响。高剂量对动物的造血机能尚有兴奋作用，使血红蛋白(Hb)含量和红细胞(RBc)数均较空白对照组增高，尤其是红细胞数显著增高(P＜0．01)。此外，高、中剂量对肾功能亦有一定的有益作用，能提高肾脏排泄蛋白质代谢产物--肌酐的功能，从而明显降低血肌酐含量。
表4 救脑益智胶囊给药180天对大鼠血象的影响(X±SD)
| 组 别 |
n |
Hb(g/L) |
RBC
(10.12/L) |
WBC(10.9/L) |
WBC分类(%) |
| 多核 |
单核 |
淋巴 |
嗜酸性 |
| 高剂量组 |
20 |
182.81±8.30 |
8.28±0.33 |
15.46±5.48 |
21.30±2.95 |
1.74±0.74 |
76.50±4.04 |
0.29±0.07 |
| 中剂量组 |
20 |
175.75±14.13 |
7.80±0.56 |
15.69±6.19 |
21.20±2.91 |
1.53±0.84 |
77.00±3.47 |
0.20±0.06 |
| 低剂量组 |
20 |
179.60±14.96 |
8.12±0.45 |
16.20±6.37 |
15.8±2.65 |
2.00±1.20 |
83.81±4.38 |
0.54±0.50 |
| 空白对照组 |
20 |
178.24±14.80 |
7.64±0.45 |
16.00±5.24 |
12.6±2.95 |
0.98±1.75 |
82.56±3.65 |
0.25±0.16 |
注：各组数值均在生理值范围内，各给药组与空白对照组比较，☆P＜o．05
☆☆P＜0．01，其余P＞0．05
表5 救脑益智胶囊给药180天对大鼠肝肾功能的影响(X±SD)
| 组 别 |
n |
肝功能 |
肾功能 |
| SGPT(赖氏单位) |
TTT(单位) |
BuN(mmol/L) |
Cr(μmol/L) |
| 高剂量组 |
20 |
30.25±13.15 |
2.38±0.48 |
5.80±0.76 |
64.96±35.64 |
| 中剂量组 |
20 |
33.96±16.28 |
2.21±0.47 |
5.51±0.81 |
74.68±26.17 |
| 低剂量组 |
20 |
36.08±16.89 |
2.24±0.44 |
4.86±0.56 |
93.15±35.75 |
| 空白对照组 |
20 |
37.25±14.16 |
2.27±0.38 |
5.91±0.88 |
105.60±48.16 |
注：1、各组各指标数值均在生理值范围内。
2、各给药组各指标与空白对照组比较，P＜0．05，其余P＞0．05。
(四)救脑益智胶囊连续给药180d并停药21d后对大鼠血象、肝肾功能的影响：实验结果见表6和表7。高、中、低三剂量，对动物的血象、肝功能和肾功能亦均无毒性影响。各给药组各项指标与空白对照组相应指标比较，其差异均无显著意义(P＞0．05)。
(五)对大鼠重要组织病理形态学的影响：救脑益智胶囊高、中、低三种剂量连续给药180d及给药180d后停药21d的两批大鼠，以及空白对照组大鼠，在给药期停药期满后24R、，将大鼠断头处死，立即剖取动物的心、肝、肺、肾、脑组织块，各鼠各器官取材于同一部位，常规固定、包埋、切片、H、E染色，光镜观察。
表6 连续给药180d停药21d后对大鼠血象的影响(X±SD)
| 组 别 |
n |
Hb(g/L) |
RBC
(10.12/L) |
WBC(10.9/L) |
WBC分类(%) |
| 嗜中性 |
淋巴 |
酸性 |
| 高剂量组 |
6 |
185.56±19.14 |
7.18±0.66 |
18.2±4.45 |
18.6±2.09 |
81.5±3.45 |
0.54±0.27 |
| 中剂量组 |
6 |
174.35±22.44 |
7.51±0.98 |
18.1±4.34 |
24.6±2.90 |
76.8±2.95 |
0.71±0.17 |
| 低剂量组 |
6 |
160.51±13.34 |
7.16±0.64 |
18.0±3.94 |
15.9±2.71 |
81.2±3.67 |
0.34±0.23 |
| 空白对照组 |
6 |
188.80±6.24 |
7.08±0.73 |
16.6±5.58 |
26.6±2.84 |
73.9±3.45 |
0.40±0.25 |
注：1、各组各指标数值均在生理值范围内。
2、各给药组各项指标与空白对照组比较P＞0．05．
表7 连续给药180d停药21d后对大鼠肝肾功能的影响(X±sD)
| 组 别 |
n |
肝功能 |
肾功能 |
| SGPT(赖氏单位) |
TTT(单位) |
BuN(mmol/L) |
Cr(μmol/L) |
| 高剂量组 |
6 |
23.47±9.58 |
1.47±0.44 |
5.32±1.69 |
90.45±32.51 |
| 中剂量组 |
6 |
33.13±4.46 |
2.06±1.26 |
6.08±1.81 |
84.60±21.94 |
| 低剂量组 |
6 |
24.26±10.27 |
1.85±1.16 |
5.42±1.47 |
76.87±10.53 |
| 空白对照组 |
6 |
31.33±10.83 |
2.51±1.38 |
5.47±1.34 |
76.76±21.22 |
注：各给药组各项指标与空白对照组比较，P＞0．050
病理检验结果如下：
肝：无明显淤胆和炎症、脂变、坏死。
肺：无明显充血、水肿、出血和炎症反应。
肾：间质无出血或炎症，未见管型等，末见小管明显变性坏死。
心：心肌纤维无水肿、炎变或变性坏死。
脑：神经元、胶质、脑膜均未见异常。
以上观察表明，所查的救脑益智胶囊给药组大鼠和空白对照组大鼠的心
肾、脑等器官均未发现有毒性损害性病理的组织改变。
四、结论
经大鼠长期毒性试验结果表明，用救脑益智胶囊较大剂量(成人剂量的25倍，50倍和100倍量)给大鼠连续口服较长疗程(90d及180d，对大鼠的生长发育(体重增长)、造血功能、肝脏功能和肾脏功能均无毒性反应，对大鼠心、肝、肺、肾、脑等器官亦末发现有毒性损害性病理组织改变，表明较长疗程和大剂量服用救脑益智胶囊毒性甚低、安全，此外，在此试验中还观察到救脑益智胶囊尚具有增进食欲、促进幼年动物生长、兴奋造血机能(升高血红蛋白及红细胞数)等强壮作用。
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